728x90 반응형 SMALL Natural Intelligence/Microscopy8 전자 현미경 (Electron microscopy) 전자 현미경 (Electron microscopy) 광학 현미경의 배율에는 이론상 한계가 없으나 가시광선의 최소파장이 고정되어 있기 때문에 분해능은 최대 약 200nm 정도이다. 그러나 전자는 광자보다 파장이 훨씬 짧다. 전자현미경 (EM)은 광자빔이 아닌 전자빔에 초점을 맞춰 시료를 촬영함으로써 글루타메이트 분자 반지름에 해당하는 0.2nm까지 분해능을 1000배까지 높일 수 있다. EM은 시냅스, 시냅스 소포 및 이온 채널과 같은 작은 신경 구조를 검사하는 데 필수적이다. EM 사용의 주요 제한 사항은 표본을 고정하고, 탈수하고, 화학적으로 처리해야 한다는 것이다. 따라서 EM은 살아있는 샘플에 적용될 수 없다. 또한 살아있는 세포에 존재하지 않는 인공물이 나타날 수 있다. 이러한 인공물을 줄이기 위.. 2022. 3. 2. 형광 현미경의 기본 형태 표면형광 현미경 (epifluorescent microscopy) 형광현미경의 가장 기본적인 형태는 광시야 형광현미경으로도 알려진 표면형광 현미경이다. 형광 프로브로 표지된 표본은 여기 파장의 빛에 의해 조명된다 (그림 A). 그런 다음 파장에는 불투명하지만 방출된 빛의 더 긴 파장을 투과시키는 두 번째 필터를 사용하여 표본을 본다. 따라서 접안렌즈를 통해 투과되는 유일한 빛은 표본에서 방출되는 빛이다. Epifluorescence는 훌륭한 도구이지만 한 가지 주요 단점이 있다. 빛은 표본의 전체 깊이에 걸쳐 형광단을 여기시킨다. 따라서 형광 신호는 초점면뿐만 아니라 이 평면의 위와 아래 영역에서도 수집된다. 이러한 배경 형광은 흐릿하고 대비가 부족한 흐릿하고 초점이 맞지 않는 이미지로 이어질 수 있다... 2022. 3. 2. 형광 현미경 (Fluorescence microscopy) 형광 현미경 (Fluorescence microscopy) 형광 현미경은 특정 파장에서 빛을 흡수한 다음 다른 (일반적으로 더 긴) 파장에서 빛을 방출하는 특성을 가진 형광단이라고 하는 특수 분자를 활용한다. 청색광을 흡수하는 형광단은 일반적으로 녹색광을 방출한다. 녹색 빛을 흡수하는 형광단은 빨간색을 방출한다. 적색을 흡수하는 형광단은 적외선을 방출한다. 상업적으로 이용 가능하고 일반적으로 사용되는 수십 개의 형광단 분자가 있으며 각각 고유한 흡수 (excitation) 및 방출 파장이 있다 (그림 C). 이러한 분자는 항체 또는 기타 분자 프로브에 연결되어 세포 내의 특정 단백질, 세포 소기관 또는 기타 구조의 존재를 나타낼 수 있다. 형광 현미경의 주요 용도는 이러한 형광 시약으로 표지되거나 유전적.. 2022. 3. 2. 광학 현미경 (Light microscopy) 광학 현미경 (Light microscopy) 광학 현미경은 가시광선을 사용하여 표본을 조명하고 이미지화하는 모든 현미경이다. 여기에는 모든 파장으로 구성된 백색광과 형광 현미경에 사용되는 특정 파장의 빛이 포함된다. 일반적으로 사람들이 광학현미경을 언급할 때 형광현미경은 물론 빛을 사용하지만 비형광현미경을 말한다. 광학 현미경의 가장 일반적이고 일반적인 형태는 명시야 현미경 (brightfield microscopy)으로 빛이 표본을 직접 통과하거나 표본에서 반사된다. 대부분의 세포와 조직은 수분 함량이 높기 때문에 투명하다. 자연적으로 착색되거나 인공적으로 염색되지 않는 한, 명시야 현미경을 사용하여 뚜렷한 구조를 구별하기 어렵다. 따라서 다양한 조직학적 절차가 다양한 현미경 구조 간의 대비를 향상시.. 2022. 3. 2. 입체 현미경 설계 입체 현미경 설계 해부현미경이라고도 하는 실체현미경은 복합현미경과는 다른 용도로 사용되며 다른 방식으로 작동한다. 신경과학에서 실체 현미경의 주요 목적은 뇌의 표면, 조직 조각 또는 큰 신경 구조를 검사하는 것이다. 해부, 수술 또는 전극이나 임플란트와 같은 작은 도구의 제작 중에 필요한 미세 조작에 특히 유용하다. 단일 대물 렌즈 시스템과 접안 렌즈 시스템을 통과하는 대신 실체 현미경의 빛은 두 개의 개별 렌즈 시스템을 통과한다. 복합 현미경이 단일 광 경로에서 양쪽 눈으로 빛을 보내는 반면, 입체 현미경은 두 개의 독립적인 광 경로에서 각 눈으로 빛을 보낸다. 표본의 단일 지점에서 나오는 빛이 두 개의 다른 경로를 통해 독립적으로 이동하여 각 눈에 도달하기 때문에 표본은 3차원으로 보인다. 표본의 모.. 2022. 3. 2. 복합 현미경 설계 복합 현미경 설계 수세기 동안 사용되어 온 가장 단순한 형태의 현미경은 돋보기이다. 돋보기는 가까이 있는 물체를 확대하는 볼록 렌즈이다. 물체에 의해 산란된 빛을 유리 반대편의 초점으로 굴절시켜 작동한다. 나타나는 것은 렌즈 뒤에 있는 물체의 더 큰 이미지이다. 단일 렌즈는 배율이 제한되어 있지만 여러 렌즈를 배열하여 각 렌즈의 배율을 곱할 수 있다. 이것은 복합 현미경의 기초이다. 화합물이라는 용어는 물체를 확대하기 위해 함께 사용되는 두 개 이상의 렌즈를 나타낸다. 대부분의 광학 현미경은 적어도 두 개의 렌즈를 사용한다. 첫 번째 렌즈는 대물 렌즈라고 하며 표본에 인접하게 배치된다. 원하는 배율 (보통 4X, 10X, 20X, 40X, 100X)을 위해 여러 대물 렌즈 중에서 선택할 수 있다. 두 번.. 2022. 3. 2. 현미경 관찰 (Microscopy) 현미경 관찰 (Microscopy) 최초의 현미경은 17세기에 세포와 단세포 유기체의 미세한 세계를 드러내는 데 사용되었다. 종종 현미경의 아버지라고 불리는 Robert Hooke와 Anton von Leeuwenhoek와 같은 과학적 개척자들은 다양한 살아있는 유기체의 세포 유형을 연구하기 위해 집에서 만든 현미경을 사용했다. 19세기 후반과 20세기 초반에 Santiago Ramón y Cajal은 조직학과 함께 현미경을 사용하여 신경계 구조에 대한 매우 상세하고 획기적인 연구를 수행했다. 현미경은 이제 신경과학에서 없어서는 안될 도구이다. 세포 소기관, 신경교 세포, 뉴런, 심지어 뉴런 집단까지도 육안으로 볼 수 없기 때문에 현미경은 세포 수준에서 신경계를 검사하는 데 필수적이다. 광학 현미경은 물.. 2022. 3. 2. 이광자 현미경 (Two-Photon Microscopy) 이광자 현미경 (Two-Photon Microscopy) 2광자 레이저 스캐닝 현미경이라고도 하는 정밀 형광 현미경을 더욱 개선한 것이다. epifluorescent 또는 confocal microscopy에서 특정 파장의 빛의 단일 광자는 형광단을 여기시켜 빛을 방출한다. 2광자 현미경에서 형광단은 2개의 광자를 동시에 효과적으로 흡수함으로써 여기될 수 있다. 이 경우 각 광자는 자체적으로 일반적인 여기 (excitation) 파장의 2배인 파장을 가지므로 광자당 에너지 준위가 절반이다. 형광단이 두 개의 저에너지 광자를 동시에 흡수할 때 각각은 더 많은 에너지와 더 짧은 파장을 가진 단일 광자가 형광단과 상호작용하는 데 필요한 여기 에너지의 절반을 제공한다. 주요 장점은 두 광자의 거의 동시 도달이 .. 2022. 3. 2. 이전 1 다음 728x90 반응형 LIST
